Tema 1 - Control y Prevención - 20/01

Clase del 20/01 Por Ana Muniesa

Presentación

Tema 1 — Control de la salud y prevención de enfermedades en centros de experimentación animal

1. Importancia de los controles sanitarios

Las enfermedades infecciosas y parasitarias en animales de laboratorio pueden:

Provocar infecciones clínicas y subclínicas.
Aumentar la mortalidad.
Alterar parámetros fisiológicos y de comportamiento.
Reducir la esperanza de vida.
Contaminar muestras biológicas.
Introducir riesgos zoonóticos.
Comprometer la reproducibilidad y validez científica de los resultados.

Por ello, el control sanitario es un pilar esencial de:

La calidad científica.
El bienestar animal.
La bioseguridad.
El cumplimiento legal.

2. Unidades microbiológicas

Definición:
Entidad microbiológica autónoma con espacios y flujos separados para animales, personal y materiales.

Tipos:

Instalaciones con barreras sanitarias.
Sistemas de microaislamiento.
Jaulas ventiladas individualmente (IVC) en cabinas de flujo laminar.

3. Factores de riesgo de contaminación

Riesgo alto

Introducción frecuente de animales.
Animales de múltiples orígenes.
Instalaciones polivalentes.
Alta rotación de personal.
Equipos compartidos no desinfectables.
Acceso de roedores salvajes o insectos.
Movimientos frecuentes entre unidades.

Riesgo bajo

Colonias cerradas.
Sistema “todo dentro–todo fuera”.
Pocas introducciones externas.
Experimentos homogéneos.

4. Vías de entrada y propagación de patógenos

Material biológico: tejidos, tumores, líneas celulares, sueros, gametos.
Material experimental: instrumental, agua, aire.
Personal: portadores biológicos o mecánicos.
Vectores: insectos, roedores salvajes.
Animales: especialmente de origen desconocido o inmunodeprimidos.

5. Medidas de prevención

Diseño de instalaciones basado en bioseguridad.
Barreras físicas y operativas.
Control estricto de accesos.
Manejo adecuado de animales, personal y materiales.
Programas de cuarentena.
Uso de equipos dedicados por unidad.

6. Animales SPF (Specific Pathogen Free)

Características:

Libres de patógenos específicos certificados.
Alto valor científico por su estatus microbiológico conocido.

Requisitos:

Barreras físicas estrictas.
Manejo controlado.
Monitorización sanitaria periódica.

Ventajas:

Mayor reproducibilidad experimental.
Menor variabilidad biológica.
Mayor protección frente a brotes.

7. Factores que influyen en la prevalencia de patógenos

Cepa o estirpe animal.
Sistema inmune.
Edad y sexo.
Condiciones de alojamiento.
Movimientos de colonias.
Rutinas de trabajo.
Nivel de bioseguridad.

8. Controles sanitarios según FELASA

FELASA (Federation of European Laboratory Animal Science Associations) establece guías internacionales para:

Selección de agentes a monitorizar.
Frecuencia de muestreo.
Métodos diagnósticos.
Interpretación de resultados.
Elaboración de informes sanitarios.

Objetivos:

Garantizar calidad microbiológica.
Armonizar programas sanitarios.
Cumplir exigencias científicas, éticas y legales.

9. Diseño de un programa de control sanitario

Debe considerar:

Unidad microbiológica.
Especies alojadas.
Estado inmunológico.
Tamaño de población.
Frecuencia de muestreo.
Métodos diagnósticos.
Historial sanitario.
Riesgos específicos locales.

Adaptación según:

Objetivos de investigación.
Uso comercial o experimental.
Prevalencia regional.
Legislación vigente.

10. Elección de agentes patógenos a controlar

Criterios:

Especificidad de especie.
Potencial zoonótico.
Prevalencia conocida.
Impacto científico.
Estado sanitario deseable.
Historial de la unidad.

Las guías FELASA recomiendan listados específicos para:

Ratón.
Rata.
Cobaya.
Hámster.
Conejo.

Incluyen virus, bacterias, hongos y parásitos, con frecuencia trimestral o anual según riesgo.

11. Agentes oportunistas y emergentes

Microorganismos normalmente comensales o no patógenos.
Pueden causar enfermedad en animales inmunodeprimidos o genéticamente modificados.
Especial relevancia en roedores transgénicos y modelos knockout.

12. Selección de animales para muestreo

Animales residentes o centinelas.
Ambos sexos y diferentes edades.
Aumento de tamaño muestral si hay varias salas.
Animales enfermos o muertos siempre deben analizarse.

Uso de animales centinela

Indirectos: contacto con fómites.
Directos: cohabitación.
Tiempo mínimo: 6 semanas (ideal 10–12).
Renovación trimestral.
Preferible inmunocompetentes jóvenes para serología.

13. Métodos de detección

Diagnóstico directo

PCR.
Cultivo.
Inmunofluorescencia.
Coprología.

Diagnóstico indirecto

Serología (ELISA, IFI, IHA).

Evaluaciones adicionales

Necropsia.
Histopatología.
Examen dermatológico y parasitológico.

Debe valorarse siempre la sensibilidad y especificidad de cada prueba.

14. Fiabilidad diagnóstica

Serología

Falsos positivos: infecciones pasadas, anticuerpos maternales, reacciones cruzadas.
Falsos negativos: infecciones recientes, respuesta inmune débil.

PCR

Falsos positivos: contaminación.
Falsos negativos: inhibidores, baja carga patógena, muestra inadecuada.

15. Informe de control sanitario (Health Monitoring Report)

Debe incluir:

Identificación de la unidad.
Especies y cepas.
Tipo de alojamiento.
Frecuencia de pruebas.
Patógenos monitorizados.
Métodos diagnósticos.
Resultados actuales e históricos.
Hallazgos anatomopatológicos.
Comentarios relevantes.
Responsable del programa.

16. Control y mantenimiento del estado sanitario

Historia natural de la infección

Introducción del patógeno.
Periodo de incubación.
Propagación.
Periodo de latencia.
Respuesta inmune (IgM, IgG).
Eliminación (no siempre).

Puntos críticos de control

Entrada del patógeno desde el exterior.
Propagación dentro de la unidad.

17. Sospecha de infección

Indicadores:

Signos clínicos (muerte, diarrea, fiebre, tos).
Cambios de comportamiento.
Alteraciones productivas (ingesta, crecimiento).
Resultados laboratoriales inesperados.

18. Confirmación diagnóstica

Repetir la prueba.
Usar método alternativo.
Analizar muestras adicionales.
Cambiar de diagnóstico indirecto a directo si es necesario.

19. Análisis de brecha de bioseguridad

Determinar momento de infección.
Identificar fallos en bioseguridad.
Valorar potencial de transmisión.
Definir extensión del problema.
Estimar necesidad de cuarentena.

20. Plan de acción ante introducción de patógenos

En instalaciones de investigación

No actuar.
Mantener animales hasta fin de experimento.
Sacrificio selectivo.

En instalaciones de cría

No intervenir (patógenos poco relevantes).
Reciclaje de colonia.
Sacrificio inmediato (patógenos graves o zoonóticos).

21. Estrategias según impacto del patógeno

Situación	Estrategia
No relevante	Sin cambios
Poco infeccioso/patogénico	Limpieza y reposición
Tratable	Tratamiento + cuarentena
Muy infeccioso, baja patogenicidad	Sacrificio parcial o aislamiento
Muy infeccioso y patogénico/zoonótico	Sacrificio inmediato y saneamiento

22. Plan de contingencia

Confirmar.
Contener.
Erradicar.
Prevenir reinfección.

23. Consideraciones finales

Formación continuada del personal.
Actualización periódica de agentes a monitorizar.
Uso rutinario de animales centinela.
No siempre se exige estatus SPF, pero sí control documentado.
Los programas deben adaptarse a cada instalación.
Responsable sanitario con formación acreditada.
Los informes deben servir para mejorar el manejo, no solo informar.

(Información complementaria actualizada)

Las guías FELASA 2014 siguen siendo el estándar europeo de referencia.
Cada vez se recomienda más el uso de PCR multiplex y monitorización ambiental (polvo de filtros, aire de jaulas IVC) para reducir el número de animales muestreados.
La tendencia actual es integrar los controles sanitarios dentro de los sistemas de gestión de calidad (GLP, ISO 9001) y de bienestar animal (3Rs). Reusar, Reducir y Refinar